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胎牛血清知多少?

你在這里

胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料,經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過(guò)濾后而成。本產(chǎn)品無(wú)支原體、無(wú)牛病毒、無(wú)噬毒體、內毒素含量低于1EU/ml,適用于細胞、組織器官培養、細胞株保藏、單抗研制,是醫院、科研院校、動(dòng)物疫苗、生物制藥廠(chǎng)家重要培養基之一。?

wolcavi公司提供三種規格:500ml/200ml/100ml?
保存/運輸:-5°C~-20°C
胎牛血清
牛血清的質(zhì)量要求
隨著(zhù)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和生活水平的不斷提高對生物醫藥產(chǎn)品的質(zhì)量要求也越來(lái)越高,所以對制備工藝中所涉及到
的各種原材料的質(zhì)量標準要求也越來(lái)越高,特別是對用于細胞培養基中的主要天然成份――牛血清的質(zhì)量要求也
不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。
胎牛血清
(一)、WHO公布的《用動(dòng)物細胞體外培養生產(chǎn)生物制品規程》中的要求:
1. 牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。
2.有些國家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。
3.證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。
4.血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌,保證無(wú)菌。
5.無(wú)細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無(wú)細菌噬菌體污染。
6.對細胞有良好的支持繁殖作用。
(二)、我國在對牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包
括蛋白質(zhì)含量,細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素,支持細胞增殖檢查。
(三)、美國對牛血清的質(zhì)量要求:Gibco 和Sigma二家主要的美國牛血清供應商的牛血清都已進(jìn)入到我國市場(chǎng),
他們對其質(zhì)量標準要求都極為嚴格,從血清來(lái)源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規定。
1) 血清來(lái)源:可從世界各國收集胎牛血清,但是必須符合他的質(zhì)量標準和美國農業(yè)部進(jìn)口要求。地方當局還不
清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說(shuō)明血清質(zhì)量的證明資料:包括收集過(guò)程的全部資料、檢驗
結果和交付情況。
2)血清的收集:胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個(gè)月內)血清靜脈取血。血清采集條
件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標準:低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅
活。
3)血清的制備:
a. 超低IgG胎牛血清:通過(guò)親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量減到最低,一般IgG≤5ug/ml,生物學(xué)活性不變。
b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧
化酶/過(guò)氧化酶方法測定)。
c. γ-射線(xiàn)照射:已經(jīng)證明γ-射線(xiàn)照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。
而且這個(gè)劑量的γ-射線(xiàn)照射不會(huì )改變血清的理化性質(zhì)和對細胞培養的影響。
4)除菌過(guò)濾:經(jīng)過(guò)上述處理的粗制血清再經(jīng)過(guò)一系列除菌濾膜過(guò)濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要
通過(guò)三層0.1微米濾膜,其他血清可通過(guò)0.2微米濾膜。
4.終產(chǎn)品血清質(zhì)量
1)化學(xué)檢定:滲透壓pH
蛋白含量――電泳法
白蛋白 球蛋白 血紅蛋白
隨著(zhù)牛年齡增加血清中總蛋白含量相應增加,總的血清蛋白含量可以確定產(chǎn)品規格和年齡。
2) 微生物學(xué)檢查:細菌、真菌符合USP標準。
支原體:在支原體專(zhuān)業(yè)培養基上培養了3~4周,培養溫度36℃±2℃
分別在需氧和厭氧條件下進(jìn)行,有的還需要在支原體瓊脂培養皿上傳4次,Hoechst熒光素DNA染色檢查那些培養法
無(wú)法檢出的支原體如豬鼻支原體等。
3)內毒素檢測
用鱟試劑檢查。
4)細菌噬菌體檢查
主要檢查E.Coli(C300 or K-12)噬菌體。
5)激素含量測定
每批FBS對某些激素含量都要進(jìn)行測定,包括:雌二醇、胰島素、孕硐、睪丸素、甲狀腺素等。
6)血紅蛋白檢測
血紅蛋白與氧合血紅蛋白的比≥70%,血紅蛋白含量≤mg15/dl。
7)細胞生長(cháng)效果測定
a.細胞克隆效果測定
細胞選擇:Sp20/Ag-14 或P3X63-Ag8.653
?胎牛血清
保存血清最好的方法是什么? 上海信帆生物建議血清應保存在-5℃至-2O℃。但是,若存放于 4℃時(shí),請勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。反復凍融會(huì )對血清的品質(zhì)造成不良影響。

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Wolcavi Biotech致力于干細胞免疫治療、分子生物學(xué) 、免疫學(xué)、體外診斷等相關(guān)領(lǐng)域的實(shí)驗需求產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和銷(xiāo)售。主要產(chǎn)品有抗原抗體|無(wú)血清培養基|細胞培養耗材并代理銷(xiāo)售Abcam、Invitrogen(Gibco)、Roche、Sigma、R&D、Meridian等二十多家國外知名品牌。

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