目前，對絲狀真菌的計數主要是計其孢子數。通過(guò)孢子數的測定，可以對比不同培養條件下菌株的生長(cháng)狀況，優(yōu)化出更優(yōu)的培養基組分、溫度、PH等。此外，孢子計數還是研究其萌發(fā)率的基礎。

而實(shí)驗室常用的計數真菌孢子數量的方法是血球計數法和平板菌落計數法，其過(guò)程費時(shí)費力，且不同人員間操作誤差大。JIMBIO CC 新型細胞計數儀的出現可替代此類(lèi)方法，提高計數效率，給出準確客觀(guān)的計數結果。

1. 材料與方法

1.1 材料

菌種：新月彎孢霉（Curvularia lunata）

培養基 ：馬鈴薯 200 g；蔗糖 20 g；瓊脂 20 g；水 1000 ml。

1.2 孢子懸液的制備：

1.2.1 在50ml離心管中加入5ml左右含0.05%吐溫80的生理鹽水。

1.2.2 用槍頭將固體培養基上的孢子刮下。

1.2.3 劇烈震蕩后，用八層紗布過(guò)濾兩次至15ml離心管中（中間用5ml 含

0.05%吐溫80的生理鹽水洗一次)。

1.2.4可接到小的EP管計數，孢子很容易吸附管壁，看著(zhù)吹打勻。

2. 結果與分析

圖1.? 新月彎孢霉孢子懸液計數

表1 計數儀計數結果與血球計數板對比

從上述圖表中可看出，計數儀測得顆粒平均直徑10 μm左右，且集中度高，與實(shí)際孢子粒徑相當。與計數板結果比對中，從0.5*10^6至2.0*10^6的濃度梯度中，計數儀技術(shù)結果與血球計數板結果相當，且數值波動(dòng)較小。

因為會(huì )有少量的細小菌絲或碎片殘留（如在5 μm處），但較之整個(gè)計數結果占比很小，可以忽略不計或人工選區修正。

該計數可幫助準確控制接種量，如要計算孢子萌發(fā)率的話(huà)，只需待孢子萌發(fā)后，再進(jìn)行一次過(guò)濾（需將紗布上的殘留孢子洗下），將剩余孢子計數，便可計算萌發(fā)率。

本文章轉自檢驗醫學(xué)網(wǎng)